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引加生物的T4 RNA連接酶2（截短型KQ）是在大腸桿菌中重組表達的引入了R55K和K227Q雙突變的截短型的T4 RNA連接酶2。

該酶可特異性地將DNA或RNA的預腺苷酰化的5’末端連接到RNA的3’OH末端，在連接過程中不消耗ATP進行反應，但需要預腺苷酰化接頭以開啟反應。R55K突變提高了酶的連接活性，而K227Q突變后大大降低了該酶原本所含有的輕微的從5’預腺苷酰化的DNA接頭(AppDNA)將腺苷基團轉(zhuǎn)移到RNA 5’磷酸基團的同時形成5’磷酸化DNA接頭(pDNA)的活性，從而減少了RNA的非特異性連接例如RNA串聯(lián)或自連成環(huán)。

另外，只能利用5’端預腺苷酰化的單鏈DNA或RNA作為3’端接頭，不消耗ATP，可大大降低連接反應的背景，通常是克隆microRNA或建庫時的優(yōu)先選擇。

65℃熱處理20分鐘可使該酶失去活性。

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