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引加生物的重組T4 RNA連接酶2（突變體）是在大腸桿菌中重組表達，并引入了K227Q突變的截短型的T4 RNA連接酶2。

該酶可特異性地將DNA或RNA的預腺苷酰化的5’末端連接到RNA的3’OH末端。該酶在連接過程中不消耗 ATP，但需要預腺苷酰化的接頭開啟反應。K227Q突變后大大降低了該酶原本所含有的輕微的從5’預腺苷酰化的DNA接頭 (AppDNA) 將腺苷基團轉移到 RNA 5’磷酸基團的同時形成 5’磷酸化DNA接頭 (pDNA) 的活性，從而減少了RNA的非特異性連接，例如RNA串聯或自連成環。

另外，該酶只能利用5’端預腺苷酰化的單鏈DNA或RNA作為3’端接頭，不消耗ATP，可大大降低連接反應的背景，通常是克隆microRNA或建庫時的優先選擇。65℃熱處理20分鐘可使該酶失去活性。

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